Антиденои вируси дарунравии вирусии гов Элиза Kit

Мушаххасот

 

Тартиби санҷиш ва тафсир

 

ҚАДАМИ 1 Тартиби санҷиш

1.1 Омода кардани маҳлули шустан

Wконсентратсия wмоеъи хокистари:Пеш аз истифода, маҳлули шустушӯй бояд ба ҳарорати хонагӣ (20-25 дараҷа) барқарор карда шавад ва баробар ҷунбонда шавад, то якхела шавад. Сипас маҳлули консентратсияи шустушӯиро 20 маротиба бо оби тозашуда (масалан, 5 мл маҳлули консентратсияи шустушӯй ба 95 мл оби соф илова карда мешавад) омехта кунед, хуб омехта кунед ва моеъи шустушӯиро дар ҳарорати 2-8 дараҷа барои 7 рӯз нигоҳ доштан мумкин аст.

1.2 Тайёр кардани намуна

① Тамоми хуни ҳайвонот гирифта, дар 4000 rpm барои 10 дақиқа центрифуга карда шуд ва супернатант ҷамъоварӣ карда шуд. Зардоб инчунин метавонад ба таври табиӣ бидуни гемолиз коагулятсия карда шавад.

② Намунаи хунобаро ба андозаи 1:50 маҳлул кунед (намунаи хунобаи 3ул ба ҳалкунандаи намунаи 147ул илова кунед) ва ҳаматарафа омехта кунед.

Эзоҳ: Назорати манфӣ ва мусбӣ низ бояд ҳал карда шаванд.

1.3 Омодасозии конъюгатҳои фермент

Конъюгати ферментро ба андозаи 1:250 маҳлул кунед (ба маҳлули намунаи 2ul конъюгат (x100) илова кунед) ва ҳаматарафа омехта кунед.

1.4 Тартиби санҷиш

①Маркази ферментии Microplate -ро гиред (мувофиқи шумораи намунаҳо, мумкин аст чанд маротиба ҷудо ва истифода шавад), 100ул зардоби маҳлулшударо ба тамғаи ферментии Microplate илова кунед, барои намунаҳои манфӣ ва мусбӣ ҳар як ду чоҳ гузоред ва ба чоҳи реаксия мутаносибан 100ул барои назорати манфӣ ва мусбат ҳар кадоме илова кунед. Намунаро дар чоҳ оҳиста ҷунбонда, бо истифода аз плёнкаи мӯҳр барои пӯшидани табақ ва дар ҳарорати 37 дараҷа барои 30 дақиқа инкубатсия кунед.

②Плёнкаи плитаи мӯҳркунандаро кушоед, маҳлулро дар табақ хуб ҷунбонед, ба ҳар як чоҳ 300 мкл моеъи шустани консентратсияи корӣ илова кунед ва сипас моеъро дар чоҳ партоед. Қадамҳои дар боло зикршударо 5 маротиба такрор кунед ва дар ниҳоят дар коғази абсорбенти тоза хушк кунед.

③Ба ҳар як чоҳ 100 мкл конъюгати фермент илова кунед, табақро пӯшонед ва дар ҳарорати 37 дараҷа барои 45 дақиқа инкубатсия кунед.

④Плёнкаи плитаи мӯҳркунандаро кушоед, маҳлулро дар табақ хуб ҷунбонед, ба ҳар як чоҳ 300 мкл моеъи шустани консентратсияи корӣ илова кунед ва сипас моеъро ба чоҳ партоед. Қадамҳои дар боло зикршударо 5 маротиба такрор кунед ва дар ниҳоят дар коғази абсорбенти тоза хушк кунед.

⑤Ба ҳар як чоҳ маҳлули 100 мкл субстрат илова кунед, табақро пӯшонед ва дар муддати 10 дақиқа дар 37 дараҷа дуртар аз рӯшноӣ инкубатсия кунед.

⑥Ба ҳар як чоҳ маҳлули қатъии 50µl илова кунед ва натиҷаро дар давоми 5 дақиқа муайян кунед.

 

ҚАДАМИ 2 Шарҳи натиҷа

 

Қимати OD450-и ҳар як чоҳ дар хонандаи микропласти 96-чоҳ хонда шуд.

2.1 Санҷиш

Арзиши миёнаи OD450nm назорати манфӣ буд<0.1 and the average OD450nm value of positive control /the average OD450nm value of negative control was ≥3, the experimental results were valid. Otherwise, the test should be repeated.

2.2 Усули ҳисоб

Барои ҳар як намуна, бо истифода аз намунаи ислоҳшуда ва арзишҳои назоратӣ S/P-ро ба таври зерин ҳисоб кунед:

2.3 Шарҳи натиҷаҳо

Вақте ки S/P<0.25, it is judged as negative.

Вақте ки S/P бузургтар аз 0,35 ё баробар аст, он мусбат ҳисобида мешавад.

Вақте ки 0,25 Камтар аз S/P<0.35, it is judged as suspicious, and suggest to repeat sampling and test one week later.

 

Садо Ояндасоз: маҷмӯаи антитело вируси дарунравии гови вирусӣ, Чин маҷмӯаи антитело вируси дарунравии гови элиза таъминкунандагон, истеҳсолкунандагон, завод